Penentuan akurasi melalui uji perolehan kembali (Recovery test, %R)

Ditulis Oleh : cak war | Anwar Hadi

Seringkali pengujian analit dalam suatu sampel tidak langsung diukur dengan peralatan instrumentasi namun dilakukan preparasi yang meliputi antara lain pelarutan, distilasi, destruksi atau ekstraksi. Agar hasil pengujian mempunyai akurasi tinggi maka efisiensi pelarutan, distilasi, destruksi atau ekstrasi terhadap analit tersebut harus memiliki efisiensi 100%. Dengan efisiensi 100% maka dapat dipastikan bahwa tidak ada penambahan analit karena kontaminasi atau hilangnya analit karena penguapan, adsorpsi atau absopsi selama proses preparasi sampel.

Untuk mengecek efisiensi proses pretreatment dan preparasi tersebut maka dilakukan uji perolehan kembali (recovey test, %R) yang dirumuskan sebagai berikut:

Untuk memberikan pengaruh yang nyata terhadap evaluasi akurasi melalui uji perolehan kembali maka konsentrasi akhir sampel setelah ditambahkan analit dari larutan standar (spike) berkisar antara 2 – 5 dari kali konsentrasi sampel sebelum ditambahkan analit. Namun demikian, perlu dipertimbangkan bahwa nilai konsentrasi sampel yang telah ditambahkan analit tidak boleh melebihi batas rentang kerja tertinggi pada ruang lingkup metode pengujian yang digunakan. Dengan kata lain, konsentrasi sampel yang telah ditambahkan analit harus masuk dalam regresi linear kurva kalibrasi yang digunakan.

Sedangkan analit yang ditambahkan ke sampel harus memiliki sifat-sifat, antara lain:

1)      larutan standar yang ditambahakan ke sampel (spike) memiliki kemurnian tinggi;

2)      memiliki matrik hampir sama dengan sampel; dan

3)      memilki kelarutan hampir sama dengan sampel.

Selain itu, hal yang harus dipertimbangkan adalah analit yang ditambahkan ke sampel berbentuk padatan bila memungkinkan atau larutan yang sangat pekat. Hal ini dimaksudkan agar tidak merubah matrik sampel serta menghindari pengenceran yang dapat mempengaruhi konsentrasi sampel. Sehubungan dengan hal tersebut maka volume analit yang ditambahkan ke sampel tidak boleh melebihi 2%. Bila memungkinkan direkomendasikan berkisar antara 0,01% sampai 0,1% dari volume sampel yang disyaratkan dalam metode pengujian yang digunakan. Bila penambahan analit menimbulkan kekeruhan (turbidity) maka penambahan analit ke sampel harus diulang dengan menurunkan konsentrasi atau memperbanyak volume dengan tetap menghindari terjadinya pengenceran sampel yang berlebih.

Berikut ini contoh perhitungan uji perolehan kembali untuk penentuan kadar seng (Zn) dalam air limbah dan diperoleh hasil sebagai berikut:

Secara teoritis, penambahan konsentrasi larutan spike harus dihitung terlebih dulu berdasarkan rerata konsentrasi sampel yang diperoleh yaitu 229 μg/L. Bila penambahan volume spike ke dalam volume sampel adalah 1% maka volume spike 1 mL dimasukkan ke dalam 99 mL volume sampel. Untuk mendapatkan nilai konsentrasi spike maka harus diperkirakan dengan perhitungan, sebagai berikut:

 

C_spike = 27.329 µg/L ≈ 30.000 µg/L = 30 mg/L

Sehubungan nilai konsentrasi spike telah diperkirakan, maka volume sampel 99 mL ditambahan analit 1 mL dengan konsentrasi 30.000 μg/L. Sampel yang telah ditambahkan analit tersebut diuji sesuai dengan tahapan prosedur pengujian Zn dan diperoleh hasil 523 μg/L.

Untuk mendapatkan nilai uji perolehan kembali (%R), maka hitung kadar spike dalam sampel dengan gunakan rumus sebagai berikut:

         
Dengan demikian, %R dapat dihitung sebagai berikut:

          

Rekaman setiap hasil uji perolehan kembali (%R) dan nilai konsentrasi spike yang ditambahkan kedalam sampel harus dipelihara. Rekaman tersebut dapat digunakan sebagai dasar penentuan perkiraan nilai konsentrasi spike yang harus ditambahkan kedalam sampel rutin yang memiliki matrik yang sama.

Jika batasan keberterimaan uji perolehan kembali (%R) tidak ditentukan dalam metode pengujian yang digunakan atau bagan kendali (control chart) belum ditentukan oleh laboratorium, maka sebagai batasan awal (starting point) dapat dilakukan berdasarkan Tabel 2, dibawah ini:
 

Sebagai ilustrasi, dari contoh tersebut diatas diketahui bahwa nilai konsentrasi target adalah 523 μg/L atau setara 0,5 mg/L. Dengan demikian batasan %R yang diperkenankan sesuai Tabel 2 tersebut diatas diperkirakan 80% - 110%. Sedangkan menurut hasil perhitungan sesungguhnya %R diperoleh 98%. Hal ini berarti bahwa uji perolehan kembali untuk Zn dalam air limbah tersebut memiliki akurasi yang sangat baik.